The invention more particularly relates to fusion proteins as defined above, wherein at least one of the plant cell-wall degrading enzymes is an endoglucanase. such as the one chosen among:
A invenção refere-se mais especificamente a proteínas de fusão conforme definidas acima, em que pelo menos uma das enzimas degradadoras da parede celular de plantas é uma endoglucanase, tal como a selecionada dentre:
As enzymatic characterization, the temperature and pH ranges studied did not differ significantly (p<0,05) compared to the activity of endoglucanase (CMCase).
Quanto à caracterização enzimática, as faixas de temperatura e pH estudadas não tiveram diferença significativa (p<0,05) em relação à atividade de endoglucanase (CMCase).
the endoglucanase I of T. reesei, and represented by SEQ ID NO : 24, the endoglucanase I of T. reesei, wherein the CBM domain has been deleted, and represented by SEQ ID NO : 26.
- a endoglucanase I de T. reesei, e representada pela SEQ ID NO : 24, a endoglucanase I de T. reesei, em que o domínio CBM foi deletado, e representada pela SEQ ID NO : 26.
demonstrated that the hydrolytic activity of a T. reesei endoglucanase was increased with the number of CBM added to the enzyme.
demonstraram que a atividade hidrolítica de ume endoglucanase de T. reesei foi aumentada com o número de CBM adicionado à enzima.
Thermal analysis showed that upper modules experienced higher temperatures along the cultivation, but the mild temperature increase did not harm the process, once total proteins and endoglucanase activity between both modules did not differ significantly.
A análise térmica demonstrou que os módulos superiores apresentaram as maiores temperaturas durante todo o cultivo, todavia esse aumento não prejudicou o processo, uma vez que a diferença de proteínas totais e com atividade de endoglucanase entre os módulos não foi significativa.
This study aimed the production and quantitation of enzymes of the complex cellulolytic (total cellulose, endoglucanase and and β-glucosidase) and hemicellulolytic (xylanse) obtained under solid-state fermentation using agroindustrial waste and product as substrates.
Diante do exposto, este estudo visou a produção e quantificação de enzimas do complexo celulolítico (celulase total, endoglucanase e β-glicosidase) e hemicelulolítico (xilanase), a partir de fermentação em estado sólido utilizando resíduos/produtos agroindustriais como substratos.
For P. stipata SC 04, using Protocol 1, the charges of bagasse, endoglucanase and Tween 80 were optimized (15,364% e 288,07 U totais, 0,095% respectively), obtaining glucose in concentration 2,42 times higher when compared to previous saccharification.
Para P. stipata SC 04 Protocolo 1, foram otimizadas as cargas de bagaço, endoglucanase e concentração de Tween 80 (15,364% e 288,07 U totais, 0,095% respectivamente), obtendo-se glicose em concentração 2,42 vezes superior, quando comparado com a sacarificação prévia.
the endoglucanase I of T. reesei, and represented by SEQ ID NO : 24, the endoglucanase I of T. reesei, wherein the CBM domain has been deleted, and represented by SEQ ID NO : 26.
- a endoglucanase I de T. reesei, e representada pela SEQ ID NO : 24, a endoglucanase I de T. reesei, em que o domínio CBM foi deletado, e representada pela SEQ ID NO : 26.
The analysis of PCR-RFLP of 16S-23S spacer region rDNA allowed us to distinguish the isolates belonging to biovar III from the others (biovars I, II, IIA and IIT) when digested with enzymes Taq I and Hin6 I. The sequence analysis of the partial of endoglucanase (Egl) and MutS genes allowed the classification in phylotypes and the results revealed a predominance of the phylotype II in Brazil, and four isolates were classified in the phylotype I, all belonging to biovar III
A análise de PCR-RFLP da região espaçadora 16S-23S DNAr permitiu distinguir os isolados pertencentes à biovar III das demais biovares (I, II, IIA e IIT), quando digeridos com as enzimas Taq I e Hin6 I. A análise de sequenciamento de parte dos genes endoglucanase (Egl) e MutS possibilitou a classificação em filotipos e os resultados...
- the endoglucanase I of T. reesei, and represented by SEQ ID NO : 24,
- a endoglucanase I de T. reesei, e representada pela SEQ ID NO : 24,
The thermophilic fungus Myceliophthora heterothallica F.2,1.4, isolated from poultry litter, showed high activity for β-1,4- endoglucanase (31 U/ml).
O gene codificante da β-1,4-endoglucanase de F.2,1.4 foi identificado e expresso em leveduras Pichia pastoris e em bactéria Escherichia coli.
The endoglucanase and celobiohidrolase genes from A. niger (eng1 and cbhA) were cloned in pKLAC1 vector that was then used as template to amplify the sequence of genes flanked by the sequences of the Kluyveromyces lactis signal peptide ,5;-mating factor and LAC4 gene terminator.
Os genes das enzimas endoglucanase e celobiohidrolase de Aspergillus níger (eng1e cbhA) foram clonados no vetor KLAC1 e este foi utilizado como molde para amplificação da sequência dos genes flanqueados pelas sequências do peptídeo sinal ,5;-mating factor de Kluyveromyces lactis e do
terminador do gene lac4 de Kluyveromyces lactis.
After 4, 8 and 12 days of fermentation, the enzymatic extract produced were analyzed in relation to xylanase, endoglucanase. β-glucosidase, laccase and total cellulase (FPase) activities.
Após 4, 8 e 12 dias de fermentação os extratos enzimáticos produzidos foram coletados e analisados para determinação das atividades de xilanase, endoglicanases, β-glicosidases, lacases e celulase total (FPase).
Most of the commercial pectinases assayed presented other enzyme activities, like mannanase, endoglucanase. xylanase, besides the activity stated by the manufacturers.
Adicionalmente, a maioria das preparações estudadas apresentou outras atividades enzimáticas, tais como mananase, endoglucanase, xilanase, além da atividade atestada pelos fabricantes.
All samples from the processing stage and storage period were sent to the laboratory, measured the activity of the following enzymes: ,5;-galactosidase, endoglucanase (carboxy-methyl-cellulase), xylanase, sucrase, amylase, lipase and trypsin.
Em todas as amostras foram mensuradas a atividade das seguintes enzimas: ,5;-galactosidase, endoglucanase (carboxi-metil-celulase), xilanase, sacarase, amilase, lipase e tripsina.
The purpose of this study was to evaluate the use of cocoa shell as a solid matrix to obtain endoglucanase by Aspergillus oryzae ATCC 101,4 in solid state fermentation.
Este estudo objetivou avaliar a utilização da casca da amêndoa de cacau como matriz sólida para obtenção de endoglucanase por Aspergillus oryzae ATCC 101,4 em fermentação em estado sólido.
The present study carried out the application of crude endoglucanase. produced by the Solid State Fermentation technique, in cocoa shell residue by the fungus Penicilium roqueforti ATCC 101,0, in the saccharification of lignocellulosic residues: sugar cane bagasse, rice and cajá residues.
O presente estudo realizou a aplicação de endoglucanase bruta, produzida por técnica de Fermentação em Estado Sólido, em resíduo de casca da amêndoa do cacau pelo fungo Peniciliumroqueforti ATCC 101,0, na sacarificação dos resíduos lignocelulósicos: bagaço de cana-de-açúcar, casca de arroz e resíduos de cajá.
The optimized enzyme mixture, comprised of T. reesei fraction (80%), endoglucanase (10%) and ?-glucosydase (10%), was capable of converting 68,36% ± 5,57 of the cellulose present in hydrothermal pretreated bagasse, whereas commercial cocktails Cellic CTec H2 and Celluclast converted 70,43% ± 5,03 e 49,11% ± 0,49 of the same material, respectively, under the same conditions.
A mistura enzimática otimizada, compreendida da fração T. reesei (80%), endoglucanase (10%) e ?-glicosidase (10%), foi capaz de converter 68,36% ± 5,57 da celulose contida no bagaço hidrotérmico, enquanto que os coquetéis comerciais Cellic CTec H2 e Celluclast converteram 70,43% ± 5,03 e 49,11% ± 0,49 do mesmo material, respectivamente, sob as mesmas condições de operação.
The greatest production of xylanase (7237,9 U/g of substrate) and endoglucanase (46,2 U/g of substrate) by A. fumigatus M.7,1 were noted by the fungi cultivation in corn straw and wheat bran (9,1 p/p) and cane bagasse and wheat bran (9,1 p/p), respectively.
As produções máximas de xilanase (7237,9 U/g de substrato) e endoglucanase (46,2 U/g de substrato) por A. fumigatus M.7,1 foram observadas pelo cultivo do fungo em palha de milho e farelo de trigo (9,1 p/p) e bagaço de cana e farelo de trigo (9,1 p/p), respectivamente.
in this module, K. marxianus UFV-3 were transformed with expression cassettes containing the cbhA or eng1 A. niger genes, which respectively encode an endoglucanase and a cellobiohydrolase, with secretion directed by the K. lactis ,5;-MF signal peptide, under control of the S. cerevisiae PGK promoter, and the selection mark kanMX. cbhA clones were obtained with differential expression and secretion of cellobiohydrolase, in relation to non-transformed strain, suggesting that the S. cerevisiae PGK promoter, and the K. lactis ,5;-MF signal peptide are recognized by the machinery of expression and secretion of K. marxianus UFV-3.
neste módulo, K. marxianus UFV-3 foram transformadas com cassetes de expressão contendo os genes eng1 ou cbhA de A. niger, que codificam respectivamente uma endoglucanase e uma celobiohidrolase, com secreção dirigida pelo peptídeo sinal ,5;-MF de K. lactis, sob controle do promotor PGK de S. cerevisiae, e a marca de seleção kanMX. Foram obtidos clones cbhA com expressão e secreção diferencial, em relação à cepa não transformada, sugerindo que o promotor PGK, de S. cerevisiae, e o peptídeo sinal ,5;-MF, de K. lactis, são reconhecidos pela maquinaria de expressão e secreção de K. marxianus UFV-3.
The Langmuir isotherm obtained by the experiment under non-hydrolytic conditions showed the highest Pmax and Kp parameters for BAC, while K was higher for BAL. At the end of hydrolysis, BAC was able to adsorb greater amounts of proteins compared to BAL. The enzymes cellobiohydrolase and xylanase showed higher adsorption on BAC, and endoglucanase adsorbed mostly on BAL. β-glycosidase was the enzyme that suffered less adsorption on both substrates.
A isoterma de Langmuir obtida pelo experimento em condições não hidrolíticas, revelou os parâmetros Pmax e Kp superiores para BAC, e K superior para BAL. Ao final da hidrólise, BAC foi capaz de adsorver maiores quantidades de proteínas, comparado ao substrato BAL. As enzimas celobiohidrolase e xilanase sofreram maiores adsorções em BAC, e de modo contrário, a endoglucanase adsorveu majoritariamente em BAL. A β-glicosidase foi a enzima que menos adsorveu em ambos os substratos.
...Two Acremonium species (Acremonium zeae EA08,2 and Acremonium sp. EA08,0) were examined in relation to their ability to produce cellulases (FPases), endoglucanases , ,6;- glucosidases, xylanases, ,5;-galactosidases, ,5;- arabinofuranosidases and ,6;-xylosidases in different carbon sources. The fungi were cultivated in submerged culture containing L-arabinose, D-xylose, oat spelt xylan, sugar cane ba...
...Duas espécies do fungo Acremonium (Acremonium zeae EA08,2 e Acremonium sp. EA 08,0) foram estudadas quanto ao potencial de produção de celulases com atividade de hidrólise de papel de filtro (FPases), endoglicanases, ,6;- glicosidases, xilanases, ,5;-galactosidases, ,5;- arabinofuranosidases e ,6;-xilosidases. Os fungos foram cultivados em cultura submersa (CS) contendo L-arabinose, D-xilose, xilana oat spelt, bagaço de cana ou palha de milho como fonte de carbono e alíquotas diárias foram...
... technological and economic interests is to optimize the use of biomass in industrial processes mediated by biocatalysts such as enzymes. The objective of this study was to purify and characterize an endoglucanase produced by the fungus Rasamsonia emersonii S10 in solid state fermentation, as substrate lignocellulosic residues. From the crude enzyme solution was detected 2 isoform of the enzyme, with a molecul...
... e econômicos da atualidade é otimizar o emprego da biomassa em processos industriais mediado por biocatalisadores, como as enzimas. O objetivo do presente trabalho foi purificar e caracterizar uma endoglucanase produzida pelo fungo Rasamsonia emersonii S10, em fermentação em estado sólido, tendo como substrato resíduos lignocelulósicos. A partir de solução enzimática bruta detectou-se 2 isoformas da enzima, com massas moleculares de 45 e 60 kDa, sendo escolhida a primeira para ser purificada. A so...
...more follicles observed (28,4 ± 4,17) and aspired (26,8 ± 4,12) and more oocytes recovered (10,9 ± 1,37), were noticed a decrease in number of thoses parameters in all groups from comparing the first LOPU with the second. Blood analyses did not shown any difference between gropus, however were significant changes on the post-surgical period, with a soon return to normality...
...oi realizada a prospecção de genes envolvidos na degradação da biomassa e nessa avaliação foram encontrados os genes das enzimas alfa amilase, glucoamilase, alfa glucosidase, beta glucosidase e endoglucanase. enzimas de suma importância no processo de desconstrução da lignocelulose. Todos os genes das enzimas foram similares a sequencias da bactéria Burkholderia sp SJ98, que já foi descrita na ......
.... (Bahiagrass), Meloidogyne sp., Helicotylenchus sp., Pratylenchus sp., Rotylenchulus sp. and Tylenchus sp. (Impatiens). In general, the activities of the enzymes desidrogenase, amylase, celulase and endoglucanase followed the distribution of the frequency of the soil total and nematophagous fungi ...(Complete abstract, click electronic access below)...
... banana, Meloidogyne sp., Helicotylenchus sp., Pratylenchus sp. e Rotylenchulus sp. para grama-batatais, Meloidogyne sp., Helicotylenchus sp., Pratylenchus sp., Rotylenchulus sp. e Tylenchus sp. para Impatiens. Em termos gerais, as atividades da desidrogenases, amilases, celulases e endoglucanases distribuíram-se no solo não-rizosférico de acordo......
...arification of sugarcane bagasse performed by enzymes originated from the filamentous fungi Trichoderma reesei RP98 and Mycothermus thermophilus. The capabilities of this fungi to produce the enzymes endoglucanase. xylanase, cellobiohydrolase, β-glucosidase and pectinase using two different kinds of substrate, corn cob and corn straw, were analyzed. For each enzyme produced, the optimal temperature and pH wer...
...isadas a capacidade destes fungos de produzir as enzimas endoglucanase, xilanase, celobiohidrolase, β-glucosidase e pectinase a partir de dois substratos diferentes, sabugo e palha de milho. Para cada enzima produzida, foi feita a caracterização de temperatura e pH ótimos. Os dois fungos apresentaram resultados promissores, com destaque para a produção de enzimas por Trichoderma reesei em sabugo de milho e para a produção de enzima por Mycothermus thermophilus em palha de milho. Entretanto, a produç...
...m diameter, an expressive radial thermal profile has been observed, with temperature increasing up to 10 ºC at bed central axis. With thermophilic fungus M. thermophila, average activities of endoglucanase and xylanase reached, respectively, 7,5 and 21,0 U/gss in thin-bioreactor and 5,0 and 20,0 U/gss in large-bioreactor. With mesophilic fungus T. reesei, average activities of endoglucanase and ...
...ndes nomes da literatura policial, como Edgar Allan Poe e os grandes nomes do roman noir. O que se pretende aqui, contudo, é ir além das aparências e das ligações evidentes e demonstrar que em Bufo & Spallanzani (19,5) a presença da literatura francesa vai muito além do nome do protagonista Gustavo Flávio, que escolheu ser Gustave Flaubert e dialogar com Victor Hugo e Baudelaire...
...es to produce ethanol. In order to study the hydrolyzes of sugar-cane bagasse and ferment the sugars obtained from this process, twenty-two fungi were isolated in the city of Araras-SP and tested for endoglucanase (EG) production. Aiming to optmize an enzyme cocktail, variables as temperature, optimum pH, different buffers, stability, salt influence, EDTA and ?-mercaptoethanol were tested for laccase, xylanase...
...hidrolisar e fermentar resíduos celulósicos visando a produção de etanol. Para estudo da hidrólise do bagaço de cana-de-açúcar, foram isolados 22 fungos da cidade de Araras-SP e estes testados para produção de endoglucanases (EG). Foram testadas temperatura e pH ótimos, diferentes tampões, estabilidade do coquetel e influência de sais, EDTA e ?-mercaptoetanol para lacase, xilanase, endo-?-1,4-glucanase, celobiohidrolase I, ?-glucosidase e glucoamilase. As condições padronizadas para aplicaçã...
...dentification of all isolates analyzed as pertaining to filotipo II. Eighteen isolates were grouped in
subclade IIA and just one isolate in IIB. The phylogenetic tree generated from the endoglucanase (egl) gene sequences confirmed the classification of the isolates in filotipo II and separated them into sequevares. The strains AMC22, IBSBF25,8 and IBSBF25,6 were grouped into a single clade, as we...
...primers Nmult, permitiu identificar todos os isolados analisados no filotipo II. Dezoito isolados foram agrupados no subclado IIA e apenas um no IIB. A árvore filogenética gerada a partir das sequências do gene da endoglucanase (egl) confirmou a classificação dos isolados no filotipo II e os separou em sequevares. Os isolados AMC22, IBSBF25,8 e IBSBF25,6 agruparam-se em um único clado, assim como os isolados UFV18 e UFV20, com 89% e 78% de probabilidade posteriori, respectivamente, compon...
...d enzyme was also stable over a wide pH range (3,0 - 8,0) both in the absence and presence of NaCl and presented high specificity for birchwood, beechwood and oat spelt xylans, not showing detectable endoglucanase. exoglucanase and β- xylosidase activities. After purification, optimum temperature and pH profiles remained at 60 °C and 6,0, respectively. Purified enzyme showed good stability at 40 °C, being a...
...e 2,5 M do sal durante as 4 h de incubação. A enzima bruta e purificada foi estável em uma ampla faixa de pHs (3,0-8,0) na ausência e na presença de NaCl e apresentou alta especificidade pelas xilanas birchwood, beechwood e oat spelt, não tendo sido detectadas atividades endoglucanase sobre CMC, exoglucanase em Avicel e β-xilosidase em ρNPX. Após a purificação, os perfis de temperatura e pH ótimos de reação se mantiveram em 60 °C e 6, respectivamente. A enzima pura foi, também, bastant...
...s selected for further analysis. This material was submitted to thermogravimetric analysis (TGA) and scanning electron microscopy (SEM). After the material was pretreated a second process, commercial endoglucanase E-CELTM, was used to hydrolyze the cellulosic pulp and to produce cellulose nanostructures. The nanocellulose obtained was characterized by atomic force microscopy (AFM). The AFM data shows the prese...
...l foi submetido a análises de termogravimetria (TG) e microscopia eletrônica de varredura (MEV). Por meio dessas técnicas, notou-se que houve a remoção da hemicelulose e da lignina da fibra de caroá. Em uma segunda etapa, a endoglucanase comercial E-CELTM foi utilizada para hidrolisar a polpa celulósica e gerar nanoestruturas de celuloses. A nanocelulose obtida foi caracterizada por microscopia de força atômica (AFM). Os dados de AFM evidenciaram a presença de nanocelulose cristalina com razão de ...
...se (20,30%), and lignin (15,30%). An association of enzymes acting in a concerted fashion degrades cellulose. This cellulase enzyme system consists of three major components, which are referred to as endoglucanase (carboximethylcellulase), exoglucanase (avicelase), and cellobiase (beta-glucosidase). These enzymatic components act synergistically in the hydrolysis of crystalline cellulose. The process by which ...
...iológica do materiallignocelulósico constitui uma das etapas mais importantes do ciclo do carbono. Muitos microrganismos possuem a habilidade de degradar o material lignocelulósico em diferentes graus, metabolizando os compostos intermediários de baixo peso molecular. Os microrganismos celulolíticos possuem um papel importante na degradação da celulose, uma vez que as hifas destes fungos penetram na madeira, liberam enzimas e degradam o material lignocelulósico. A maioria dos microrganismos conhecido...
...employed for this purpose, and as part of these efforts, this work consists on a set of molecular dynamics studies of three cellulolytic enzymes, namely: 1) laminarinase from Rodhothermus marinus; 2) endoglucanase 3 from Trichoderma harzianum and 3) b-glucosidase from Aspergillus niger. In general, these studies aimed to investigate the relationship between the structural arrangement and experimental data that...
...mpregado com esta finalidade e, como parte disto, este trabalho consiste em um conjunto de pesquisas desenvolvidas na área de simulação computacional via dinâmica molecular de três enzimas celulolíticas: 1) Laminarinase de Rodhothermus marinus; 2) endoglucanase 3 de Trichoderma harzianum e 3) b- glicosidase de Aspergillus niger. De modo geral, estes estudos visaram investigar a relação entre o arranjo estrutural e propriedades mensuráveis em laboratório interessantes na avaliação da performance d...
...lose is little-known. in this module we use molecular dynamics simulations (MD) to investigate these interactions as well as conformational and dynamic properties. We have studied two cellulases: the endoglucanase 3 from Trichoderma harzianum (ThEG3) and the endoglucanase from Xanthomas campestris pv. campestris (XccEG). The study of the mechanisms of substrate recognition by ThEG3 which lacks the cellulose bi...
...e a celulose é pouco conhecido. Para investigar estas interações, bem como as propriedades conformacionais e dinâmicas, nesta obra usamos simulações por dinâmica molecular (MD). Abordamos duas celulases: a endoglucanase 3 de Trichoderma harzianum (ThEG3) e a endoglucanase de Xanthomas campestris pv. campestris (XccEG). O estudo dos mecanismos de reconhecimento de substrato por ThEG3 que falta o módulo de ligação à celulose (CBM), revela que a ausência de um CBM nesta estrutura é compensada pela ...
...This work aimed to provide technological treatment to enzymatic extract rich in endoglucanase. obtained by solid state culture using the fungus Myceliophtora thermophila M77, through spray-drying. Operational parameters and adjuvants were varied in order to obtain stable enzymes with high activities during storage. The experiments were divided into adjuvant discrimination, optimization of the drying conditions...
...Este trabalho visou dar tratamento tecnológico a extratos enzimáticos ricos em endoglucanases obtidos por cultivo em estado sólido (CES) do fungo termofílico Myceliophtora thermophila M77, através da secagem por spray-drying. A fim de garantir a estabilidade das enzimas durante um período de armazenamento, o extrato enzimático bruto (EEB) foi seco em spray-dryer sendo investigados os parâmetros operacionais e os adjuvantes de secagem para garantir a maior retenção da atividade enzimática após a s...
...nvestigated. Carbon sources silvergrass, sugar cane bagasse and bamboo were tested for the enzyme production. Daily aliquots were removed for 15 days. The production of cellulases (FPase, cellobiase, endoglucanase e aril- ,6;-glucosidase) and hemicellulases ( ,5;- galactosidase, L-arabinofuranosidase, ,6;-xylosidase e xylanase) was evaluated. Besides, the characterization of the enzymes that presented h...
...% FeSO4,7H2O e 0,1% K2HPO4). Fontes de carbono forrageira, bagaço de cana e farelo de trigo foram testadas para a produção das enzimas. Alíquotas diárias foram retiradas durante 15 dias. Avaliou-se a produção de celulases (FPase, celobiase, endoglicanase e aril- ,6;-glicosidase) e de hemicelulases ( ,5;- galactosidase, L-arabinofuranosidase, ,6;-xilosidase e xilanase). Além disso, foi feita a caracterização das enzimas que apresentaram alta atividade. A forrageira foi a fonte de carbono que ...
...m diameter, an expressive radial thermal profile has been observed, with temperature increasing up to 10 ºC at bed central axis. With thermophilic fungus M. thermophila, average activities of endoglucanase and xylanase reached, respectively, 7,5 and 21,0 U/gss in thin-bioreactor and 5,0 and 20,0 U/gss in large-bioreactor. With mesophilic fungus T. reesei, average activities of endoglucanase and ...
...strato contendo fibras de bagaço, concordando com simulações. Em biorreator com diâmetro 20 cm, observou-se um perfil térmico radial expressivo, com aumento de temperatura de até 10 ºC no centro do leito. Com o fungo termofílico M. thermophila, as atividades médias de endoglucanase e xilanase atingiram, respectivamente, 7,5 e 21,0 U/gss no biorreator estreito e 5,0 e 20,0 U/gss no biorreator largo......
...The cellulolytic complex is composed mainly of endoglucanases , exoglucanases and β-glycosidases. endoglucanases act by cleaving the cellulose in the internal bonds of the fiber, while the exoglucanases hydrolyze the outer bonds. The need for new research on cellulolytic enzymes capable of efficiently degrading industrial residues such as sugarcane bagasse to reduce the cost of enzymatic hydrolysis and favor t...
...O complexo celulolítico é composto principalmente por endoglucanases, exoglucanases e β-glicosidases. As endoglucanases atuam clivando a celulose nas ligações internas da fibra, enquanto as exoglucanases hidrolisam as ligações externas. A necessidade de novas pesquisas de enzimas celulolíticas capazes de degradar eficientemente resíduos industriais como bagaço de cana-de-açúcar para diminuir o custo da hidrólise enzimática e favorecer a produção de etanol de segunda geração. neste módulo f...
..., were used as substrate, in agitated isolated cultures and co-cultivations. The maximal activities obtained in the enzymatic extracts produced by the experimental design were 3,77 U/mL and 3,66 U/mL endoglucanase and 18,8 U/mL and 17,5 U/mL β-glycosidase in the co-cultivation of the fungi Botryosphaeria sp. AM01 and Saccharicola sp. EJC04, and in the isolated cultivation of Botryosphaeria sp. AM01, respectiv...
...do como substratos o farelo de soja e a palha de cana de açúcar pré-tratada hidrotermicamente, cedida pela empresa GranBio, em cultivos isolados e co-cultivos, agitados. As atividades máximas obtidas nos extratos enzimáticos produzidos por planejamento experimental foram de 3,77 U/mL e 3,66 U/mL de endoglucanase, e 18,8 U/mL e 17,5 U/mL de β-glicosidase, no co-cultivo dos fungos Botryosphaeria sp. AM01 e Saccharicola sp. EJC04, e no cultivo isolado de Botryosphaeria sp. AM01, respectivamente. As condi�...
...id hot water pretreatment-derived
phenolic compounds were evaluated. LDHA had higher adsorption capacity on enzymes
than LDHE. At 45°C T. reesei enzymes bound to both LDHE and LDHA.
endoglucanase. beta-glucosidase and exoglucanase remained activities in the
supernatant after incubation with LDHE were 28, 45 e 63%. Exoglucanase and betaglucosidase
were completely adsorbed onto LDHA while end...
...ilce/Unesp e o efeito da LDHE e dos compostos
fenólicos derivados do pré-tratamento hidrotérmico sobre a mesma foram avaliados. A
LDHA apresentou maior capacidade de adsorção das enzimas do que LDHE. A 45°C
todas as enzimas de T. reesei se ligaram a LDHE e a LDHA. As atividades residuais de
endoglucanase, β-glicosidase e exoglucanase no sobrenante após a incubação com a
LDHE foi de 28, 45 e 63%. Exoglucanase e β-glicosidase foram completamente
adsorvidas a LDHA enquanto ...
...urs. This difference is probably the reason for the successful defense mechanism which limits pathogen growth in resistant individuals. The glucanase probe was homologous to an intracellular protein, endoglucanase. The Northern blot result showed no differential expression between resistant and susceptible individuals, indicating that the endoglucanase gene might be induced by infection with U. appendic...
...PvPR2, porém as maiores diferenças ocorreram com um intervalo de 24 h. A sonda GLU mostrou-se homóloga a uma endoglucanase básica, uma proteína intracelular. O resultado da hibridização sugere que não há uma expressão diferencial entre os indivíduos resistentes e suscetíveis, indicando que, provavelmente, o gene que codifica essa proteína é induzido por U. appendiculatus , mas a enzima não atua no processo de restrição de crescimento do fungo. Todas os cDNAs isolados neste módulo pod...
...c (MFalpha). The latter was connected upstream to engXCA gene, resulting in MFalpha-engXCA merger. This chimera was linked to vector pYES2 Saccharomyces cerevisiae (Sc) and the recombinant expression endoglucanase was secreted into the culture medium. The strain that showed the best production of the recombinant enzyme was Sc BJ35,1. When growing for 36 h at 30°C, in rich medium YPGal + CMC (carboxymethyl cel...
... Para tal, foi isolado o gene engXCA de Xanthomonas campestris pv. campestres (Xcc) e um fragmento do gene codificando para o peptídeo sinal do fator alpha de Saccharomyces cerevisiae (Sc) (MFalpha). Este foi ligado upstream ao gene engXCA, resultando na fusão MFalpha-engXCA. Tal quimera foi ligada ao vetor de expressão pYES2 de Sc e a endoglucanase recombinante foi secretada para o meio de cultivo. A linhagem que apresentou melhor produção da enzima recombinante foi Sc BJ35,1 quando cultivada po...
...ient technologies to reduce the high costs associated with saccharification enzymes. This study aimed to concentrate by ethanol precipitation glycosil hydrolases responsible for FPase, ?-glicosidase, endoglucanase and xylanase activities produced by Trichoderma harzianum P49,11. The precipitation variables tested were temperature, ethanol concentration and pH of the fermentation broth. The results showed that ...
...duzir os altos custos associados com as enzimas envolvidas na sacarificação. Este estudo teve como objetivo principal concentrar, através de precipitação com etanol, glicosil hidrolases responsáveis pelas atividades de endoglucanase, ?-glicosidase, FPase e xilanase produzidas por Trichoderma harzianum P49,11. As variáveis de precipitação testadas foram temperatura, concentração de etanol e pH do fermentado. O etanol demonstrou potencial para recuperar ao redor de 98% da atividade de xilanase corre...
...ellulolytic fungi, previous isolated by the Laboratory of Industrial Biotechnology (UNESP – Assis). These fungi were cultivated in cane bagasse as substrate and their extracts was tested as FPU and endoglucanase (CMCase) activity and compared with T. reesei CCT 27,8. The most efficient fungi were the not yet identified strains: M51, FS09, MG10A e FS11A. Respectively for FPase and CMCase activit...
...alho foi encontrar fungos celulolíticos produtores de enzimas que sejam eficientes nos processos de degradação da biomassa lignocelulósica. No presente trabalho foram selecionados 12 fungos celulolíticos previamente isolados pelo Laboratório de Biotecnologia Industrial (UENSP – Assis). Estes fungos foram cultivados em bagaço de cana-de-açúcar como substrato e para seus extratos foram testados suas atividades para celulases (FPase) e endoglucanase (CMCase) e comparados com o T.reesei CCT 27,8. Os f...
...duced greater levels of celullolytic and hemicellulolytic activities when added with wheat bran and CMC. When cultivated in wheat bran C. cubensis reached values for ,6;-glucosidase, endoglucanase and xylanase activities of 0,36 U/mL, 3,6 U/mL, 14,2 U/mL, respectively. When cultivated in CMC, C. cubensis produced ,6;-glucosidase, endoglucanase and xylanase activities of 0,48 U/mL, 2,...
...iod; cubensis produziu as atividades ,6;-glicosidase, endoglicanase e xilanase de 0,36 U/mL, 3,6 U/mL, 14,2 U/mL, respectivamente. Quando cultivado em CMC, C. cubensis produziu atividades de ,6;-glicosidase, endoglicanase e xilanase de 0,48 U/mL, 2,8 U/mL, 10,7 U/mL, respectivamente. Quando C. cubensis cresceu em xilana birchwood apresentou atividade de xilanase de 9,9 U/mL, porém não foi eficaz na produção de celulases. Fontes de carbono simples apresentaram, de maneira geral, baixa ...
...bly endosperm cell wall hydrolysis facilitates cotyledon expansion by lowering endosperm resistance and at the same time the diffusion of degradation products into cotyledons. Partial purification of endoglucanases was carried out on Sephacryl S-1,0-HR as a first step resulting 2 active fractions (I and II) on CMC. Fraction I was further purified on DEAE-Sephadex and CF11-Cellulose (affinity) columns. P...
...ansão em área do cotilédone facilitando, ao mesmo tempo, a rápida difusão dos produtos da degradação para os cotilédones. A purificação parcial das endoglucanases foi realizada utilizando-se colunas de Sephacryl S-1,0-HR numa primeira etapa, resultando em 2 grupos com atividade sobre CMC denominados I e II. Em uma segunda etapa, as endoglucanases do grupo I foram sequencialmente purificadas em coluna DEAE-Sephadex e de CF11-Celulose (afinidade). Através da focalização isoelétrica em gel...
...traw (control) were submitted to enzyme hydrolysis for 24 to 72 h at 55 °C with enzymatic solutions obtained by the cultivation of M. thermophila M.7,7. and Celluloclast 1,5L based on 60 U of endoglucanase activity per g of dry substrate or on the total amount of protein solutions (5 mg protein/g of dry substrate). The enzyme solution from M. thermophila M.7,7 was supplemented with a commercial ...
...oglucanase padronizadas a 60 U/g de substrato seco ou com relação à quantidade total de proteínas das soluções (5 mg/g de substrato seco). Ao extrato de M. thermophila M.7,7 foi feita uma suplementação com enzima β-glicosidase comercial, de modo a atingir a mesma atividade presente na enzima Celluloclast. As atividades máximas de xilanase (446,9 U/mL), endoglucanase (94,7 U/mL) e β-glicosidase (2,8 U/mL) foram obtidas no cultivo por FES com 70% de umidade, a 40 ºC, usando palha de milho e ...
... species, the present project sought to know more about the growth characteristics of this fungus and extracellular enzymes secreted in solid cultures by using lignocellulosic residues as substrates. endoglucanase. exoglucanase, βglycosidase and β-xylosidase demonstrated the best quantitative results among the enzymes tested. For the following steps, β-glucosidase and β-xylosidase enzymes were selected. Qu...
...u conhecer mais sobre as características de crescimento desse fungo e das enzimas extracelulares por ele secretadas quando em cultivos em substratos sólidos lignocelulósicos. Entre as enzimas testadas, endoglucanase, exoglucanase, β-glicosidase e β-xilosidase foram as que foram detectadas com as maiores atividades. Foram selecionadas as enzimas β-glicosidase e βxilosidase para estudos subsequentes, com cultivo do fungo em diferentes substratos, seguindo-se da purificação de ambas as enzimas e caract...
...Da. It is composed of at least 10 proteins which are involved mainly in the hydrolysis of hemicelluloses. The isolation and cloning genes that encode the enzymes arabinanase, ?-L-arabinofuranosidase, endoglucanase. galactanase, laccase e rhamnogalacturonase in B. licheniformis CBMAI 16,9 also was performed. in this module two endoglucanases , a galactanase and a laccase were expressed in heterologous sys...
...s proteicas e que hidrolisava principalmente substratos hemicelulósicos. Foi ainda realizado o isolamento e a clonagem de genes que codificavam as enzimas arabinanase, ?-L-arabinofuranosidase, endoglucanase, galactanase, lacase e ramnogalacturonase no micro-organsimo selecionado. neste módulo é relatada a expressão heteróloga, a purificação e a caracterização de duas endoglucanases, uma galactanase e uma lacase. A caracterização das endoglucanases e da galactanase indicou que essas enzimas apresen...
... emersonii S10, R. emersonii BC and T. lanuginosus FZI) as a function of experiencing growth at 60 °C. Among these strains, the highest activities of β-glucosidase (52 U/g) and endoglucanase (5,9 U/g) were obtained from the culture medium of strain R. emersonii S10 in 2,0h for both enzymes. The best activity FPase (cellulase that hydrolyzes filter paper) was presented by the fungu...
...eriod; emersonii BC) em função de apresentarem crescimento a 60ºC. Entre essas linhagens, as maiores atividades de β-glicosidase (52 U/g) e endoglucanase (5,9 U/g) foram obtidas em meio de cultivo da cepa R. emersonii S10 em 2,0h para ambas as enzimas. A melhor atividade de FPase foi apresentada pelo fungo T. lanuginosus S1 em 1,8h de cultivo, tendo produzido 262,8 U/g da enzima. O fungo R. emersonii S10 foi o único que apresentou a produção detectável das enzimas avicelas...
...equences to search for genes involved in the degradation of biomass and this assessment was also carried the genes of the enzymes alpha amylase, glucoamylase, alpha- glucosidase, beta glucosidase and endoglucanase enzymes of paramount importance in the process of deconstruction of lignocellulose found. All genes of the enzymes were similar to sequences of the bacterium Burkholderia sp SJ98, which has been desc...
...om celulose possibilitou a identificação dos microrganismos presentes no consórcio. Através dessas sequencias também foi realizada a prospecção de genes envolvidos na degradação da biomassa e nessa avaliação foram encontrados os genes das enzimas alfa amilase, glucoamilase, alfa glucosidase, beta glucosidase e endoglucanase, enzimas de suma importância no processo de desconstrução da lignocelulose. Todos os genes das enzimas foram similares a sequencias da bactéria Burkholderia sp SJ98, que j�...
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